Определение мутаций V600 в гене BRAF (качественное определение мутации V600E в гене BRAF)

Лабораторное исследование для определения генетической мутации V600Е гена BRAF. Наличие мутации провоцирует развитие меланомы, папиллярной карциномы, колоректального рака, рака яичников и ряда других опухолей различной локализации.

Зачем сдавать этот анализ?

• Меланома.
• Папиллярная карцинома.
• Немелкоклеточный рак легкого.
• Колоректальный рак.
• Рак яичников.
• Выбор препарата для химиотерапии меланомы.

Подробное описание исследования

Источники Особенности и преимущества методики Дополнительные замечания

В последнее время уделяется большое внимание различным молекулярным маркерам, характеризующим биологические свойства опухоли. Молекулярно-генетические исследования выявляют тесную связь злокачественной прогрессии опухолей с накоплением соматических мутаций.
На формирование этих мутаций могут оказывать влияние, как эндогенные (свободные радикалы), так и экзогенные факторы (факторы внешней среды). Итогом такого влияния могут стать генетические нарушения в системе восстановления ДНК.
Белок BRAF или серин-треонин-киназа является важным звеном сигнального пути (RAS-BRAF-MAPK) и играет ключевую роль в процессах дифференциации клеток, их роста и клеточной гибели. Среди трех изоформ RAF-киназы (ARAF, BRAF, CRAF) BRAF имеет наибольшую активность и чувствительность. Чаще всего генетические изменения происходят на участке V600E (T1799A) в 15-м экзоне гена BRAF, локализованного на седьмой хромомсоме.
Миссенс-мутация (точечная мутация) V600E приводит к замещению валина глутаматом в белке BRAF. Вследствие этого происходит активация процесса фосфорилирования, что оказывает существенное влияние на процесс транскрипции (перенос генетической информации с ДНК на РНК) клеток, которые участвуют в процессах дифференциации и апоптоза.
Заключительная стадия – это активация неконтролируемого роста (пролиферации) опухолевых клеток.
Мутации гена BRAF характеризует более агрессивное течение заболевания и определяются в 8 % случаев при опухолях.
Наиболее часто диагностируют при меланоме (60–70 %) и папиллярной карциноме (39– 83 %), при колоректальном раке (10–14 %), раке яичников, реже – в мелкоклеточном раке легкого.
Определить генетическую мутацию BRAF можно, используя молекулярно-генетические методы исследования. Материалом для исследования служит ДНК, полученная из биоптатов опухолевой ткани, а также из образцов тканей метастатического очага.
Базовый метод, позволяющий выявить мутации гена BRAF – полимеразная цепная реакция (ПЦР). Этот метод диагностики прост в использовании и обладает хорошей чувствительностью, но за один раз позволяет определить только одну мутацию, а их часто бывает несколько и все они имеют диагностическое значение.
Поэтому приходится выполнять еще один забор тканей, что не всегда представляется возможным. Метод, позволяющий в одном образце ткани выявить все мутации гена BRAF – секвенирование.
Ген BRAF - важный маркер для оценки природы опухоли. В основном определяется в предоперационной диагностике, а также при выборе препарата для дальнейшей химиотерапии. Потому как, например, меланома (при которой часто определяется данная мутация) обладает высоким процентом устойчивости к традиционным схемам химиотерапии.
Терапия меланомы на современном этапе представляет собой комплекс мероприятий, направленных на блокаду основных сигнальных путей, специфичных для меланомы кожи, при помощи препаратов блокирующих продукты онкогенов. В случае назначения подобных таргетных препаратов, определение статуса гена BRAF – обязательное исследование, потому как при отсутствии мутации затратное лечение окажется неэффективным, а в некоторых случаях может ускорить опухолевый процесс.

Источники

1. Клинические рекомендации, утв. Министерством здравоохранения Российской Федерации «Меланома кожи и слизистых оболочек», 2019 г.
2. Абрамова О.Э. Мутация гена BRAF V600 в опухолевых клетках – фактор неблагоприятного течения меланомы кожи? // Абрамова О.Э., Кудрявцев Д.В., Шинкаркина А.П., Гуменецкая Ю.В., Кудрявцева Г.Т., Конова М.В. – Саркомы костей, мягких тканей и опухоли кожи, 2019 г. №2. С.12-17.
3. M.Dankner, A.N.Rose, S.Rajkumar, P.M.Siegel, I.R.Watson. Classifying BRAF alterations in cancer: new rational therapeutic strategies for actionable mutations. – Oncogene, 2018. Jun;37(24):3183-3199. Doi: 10.1038/s41388-018-0171-x.

Особенности и преимущества методики

Определяется наличие или отсутствие мутации и ее вид.

Дополнительные замечания

Определяется наличие или отсутствие мутации и ее вид.

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки не требуется.

Противопоказания и ограничения

Абсолютных противопоказаний нет.

Интерпретация результата

Интерпретацию результатов исследования проводит специалист-генетик в комплексе с результатами других исследований.

Референсные значения

Мутация не обнаружена.